原子力显微镜制样是确保获得准确、可靠观测结果的重要步骤。以下是一些常用的AFM原子力显微镜制样方法及其要点:
一、基本原则
样品固定:样品需要平整且牢固地固定在基底上,以防止在扫描过程中移动或脱落。
样品清洁:确保样品表面干净,无污染物,以免影响探针和成像结果。
二、具体制样方法
1. 硬材料和块体样品
机械剥离法:
适用于硬材料,如使用针尖或刀片对样品进行划割或剥离,以获得所需的表面形貌。
优点:操作简单、成本低廉,可在常温下进行。
注意:需控制力量,避免引入人为误差导致样品损伤。
清洁与固定:
清洁样品表面,可使用氮气吹扫、酒精或丙酮等试剂清洗。
直径大于10mm的块体样品可直接放置在样品台上,通过真空吸附固定;小于10mm的样品则需粘贴到铁片等基底上进行测试。
2. 薄膜样品
清洁与粘贴:
清洁薄膜表面,确保其无杂质。
使用专用双面胶带将薄膜粘贴到基底上,确保粘贴牢固且薄膜平整无气泡。
3. 生物样品
蛋白质、DNA等:
调节溶液pH值或加入正离子等方法,利用静电相互作用将样品吸附在云母等基底上。
对于DNA,可先用硅烷化试剂修饰基底表面,使其带正电,再吸附DNA分子。
细胞样品:
溶液分散法:将细胞溶液滴加到硅片或云母上,静置后吹干。
固定方法:可采用自然干燥法、戊二醛固定法或琼脂糖凝胶固定法。琼脂糖凝胶固定法对细胞损伤小,能更好地维持细胞原始状态。
注意事项:为防止培养液中的盐等成分干扰,需对样品进行清洗。
4. 粉末样品
超声分散法:
将粉末放入酒精或丙酮等溶剂中超声分散,使其均匀。
将分散液滴加到云母、硅片或玻璃片上,加热烘干后测试。
5. 导电样品
导电衬底准备:
衬底表面需镀金、铂等导电薄膜。
使用导电银浆等将样品固定在导电衬底上,并确保样品与衬底导通。
三、注意事项
样品尺寸与形状:确保样品尺寸适合原子力显微镜的观测范围,且形状平整,无明显起伏。
样品测试面:测试面需平整,无明显缺陷或污染物。
样品固定:固定方法需牢固可靠,避免在扫描过程中样品移动或脱落。
清洗与干燥:根据样品类型选择合适的清洗和干燥方法,确保样品表面干净且无残留溶剂。
综上所述,AFM原子力显微镜制样方法需根据样品类型、形状和尺寸等因素综合考虑,以确保获得高质量的观测结果。